癌症药理学：在多百万美元项目虚拟实验室中提供建议

在这个模拟中，您将了解需要哪些工具来筛选成千上万的化学化合物，以确定对治疗不同类型癌症的有希望的候选者。特别是，您将深入了解抗癌药物筛查背景下广泛使用的体外测定的原理和局限性。作为药理专家，您将测试常用技术的稳健性，并帮助筛选设施，以评估假阴性结果的风险。

为化学敏感性测试制备细胞和药物

您在癌症药理学模拟中的主要任务是在体外方案中再现筛选设施的化学敏感性，以研究假阴性结果的原因。有问题的方案是使用MTT试剂的广泛使用的细胞存活测定，并用常规的癌细胞系进行。该项目负责人表明，用两个众所周知的化疗药物进行测试：对比素蛋白和环磷酰胺。在这部分模拟中，您将学习如何执行化学敏感性测试的常用步骤，并了解基本药理学工具。最重要的是，您将计算细胞培养液的活性细胞，并计算您实验所需的大部分文化。您还将使用给定的浓度准备两种药物的库存溶液，以产生用于治疗癌细胞的稀释系列。

执行MTT测定

一旦细胞制备并与药物孵育，就是使用MTT作为细胞存活指示剂的时间。您将能够遵循分子水平，MTT如何特异性地与线粒体酶反应，导致可以用分光光度计测量的颜色比色变。在这项任务中，您将使用多通道移液管和96孔板，以便在全球许多药理学实验室中使用的测定。

确定EC50并解释您的结果

MTT测定中的连续稀释的结果将为产生剂量响应曲线提供基础，并确定临床使用的药物的半最大有效浓度（EC50）。您将提供哪些建议，并提供关于常用体外测定的有用性的项目负责人？